目前紫外分光光度計(jì)已經(jīng)應(yīng)用在了各個(gè)領(lǐng)域中,但是只有在紫外分光光度計(jì)的選用正確的時(shí)候才能發(fā)揮其大的作用,那么紫外分光光度計(jì)吸光度范圍選擇的原則是什么呢?下面我們一起來(lái)看下:
1、吸光度值不能太小也不能太大
a、吸光度不能太小:因?yàn)楣舛仍肼暿欠治稣`差的主要來(lái)源之一,它限制被分析試樣吸光度的下限;如果試樣的吸光度太?。ㄐ盘?hào)?。蜁?huì)因?yàn)楣舛仍肼暤脑?,使儀器的信噪比下降,可能會(huì)使分析誤差增大。當(dāng)光度噪聲大到一定程度、吸光度小到一定程度時(shí),吸光度就根本不與樣品的濃度成正比。甚至?xí)a(chǎn)生試樣濃度變稀時(shí),吸光度值反而增大(噪聲所致),以致無(wú)法得到穩(wěn)定的測(cè)量數(shù)據(jù)。
b、吸光度不能太大:因?yàn)殡s散光是分析誤差的主要來(lái)源之一,它限制被分析試樣吸光度值的上限;如果試樣的吸光度太大,因?yàn)殡s散光的原因,可能會(huì)使分析誤差增大。因?yàn)殡s散光會(huì)使分析測(cè)試結(jié)果嚴(yán)重偏離比耳定律(分析測(cè)試結(jié)果的數(shù)據(jù)可能偏小,也可能偏大;若雜散光被試樣吸收則測(cè)量數(shù)據(jù)偏小,若雜散光不被試樣吸收則測(cè)量數(shù)據(jù)偏大)。如果儀器的雜散光很大或被分析的試樣吸光度值太大,吸光度就根本不與試樣的濃度成正比,甚至?xí)a(chǎn)生試樣濃度增大時(shí),吸光度值反而減小等反?,F(xiàn)象。
2、試樣濃度不能太低也不能太高
a、試樣不能太?。涸嚇犹?huì)像吸光度太小一樣,使分析結(jié)果無(wú)法得到穩(wěn)定的數(shù)據(jù)。因?yàn)?,如果紫外可?jiàn)分光光度計(jì)的噪聲太大,會(huì)使被測(cè)試的試樣濃度下限增高(信噪比變小。)
b、試樣不能太濃:在試樣量允許時(shí),試樣的濃度應(yīng)選擇靠近相當(dāng)佳吸光度值)。因?yàn)?,從理論上講,比耳定律在吸光度值為佳值時(shí),分析誤差小。
紫外分光光度計(jì)注意事項(xiàng):
1、開(kāi)機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過(guò)程中禁止打開(kāi)樣品室蓋。
2定時(shí),禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時(shí)清理干凈。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認(rèn)可方可離開(kāi)。
紫外分光光度計(jì)問(wèn)題處理:
1、如果儀器不能初始化,關(guān)機(jī)重啟。
2、如果吸收值異常,依次檢查:波長(zhǎng)設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長(zhǎng),并重新調(diào)零)、測(cè)量時(shí)是否調(diào)零(如被誤操作,重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(cuò)(測(cè)定紫外波段時(shí),要用石英比色皿)、樣品準(zhǔn)備是否有誤(如有誤,重新準(zhǔn)備樣品)。